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      豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體(IgG)診斷

      豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體(IgG)診斷

      產品型號:

      所屬分類:動物疾病類ELISA快速檢測試劑盒

      產品時間:2023-07-26

      簡要描述:豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體(IgG)診斷試劑盒本試劑盒主要目的是測定豬血清中豬藍耳病毒抗體,可用于評估感染豬的血清學診斷以及豬藍耳病毒疫苗免疫狀況分析。

      詳細說明:

      EA02A00                     2016-01版

      豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體(IgG)診斷試劑盒(酶聯免疫法)說明書

      【產品名稱】

      通用名稱豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體(IgG)診斷試劑盒(酶聯免疫法)

      英文名稱:Diagnostic Kit For Antibodies To

      Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(PRRSV Ab),ELISA

      【規格】

      96T×2/盒

      【預期用途】

      本試劑盒主要目的是測定豬血清中豬藍耳病毒抗體,可用于評估感染豬的血清學診斷以及豬藍耳病毒疫苗免疫狀況分析。

      【檢驗原理】

      本試劑盒應用固相酶聯免疫吸附試驗(ELISA)原理,由包被有高純度的豬藍耳病毒抗原的微孔反應板、辣根過氧化物酶標記的抗豬IgG及其它試劑配套組成。其反應機理為包被抗原與樣本中的PRRSV-Ab結合,再與酶標抗豬IgG抗體形成包被抗+PRRSV-Ab+酶標抗豬IgG抗體復合物,加入顯色劑,通過酶催化反應顯色。顯色深淺與PRRSV-Ab的量成正比,當樣本反應顯色后,經酶標儀檢測所得結果超過設定的臨界值時結果判為陽性,即表明免疫產生了抗體或有自然感染存在。

      【主要組成成份】

      1

      PRRSV抗原包被板

      96T×2

      2

      酶標記物

      22ml

      色帽

      3

      樣本稀釋液

      50ml

      透明

      4

      PRRSV-IgG陰性對照血清

      1.5ml

      綠色帽

      5

      PRRSV-IgG陽性對照血清

      1.5ml

      紅色帽

      6

      顯色劑

      12ml×2

      色帽

      7

      終止液

      12ml

      色帽

      8

      20X濃縮洗滌液

      50ml

      白色帽

      9

      蓋板膜

      2張

       

      10

      說明書

      1份

       

      【自備器材】

      1酶標儀,雙波長450/630nm濾光片

      2.微量移液器(單道1-100ul、0.5-10ul、多道30-300ul)

      3.水浴箱或恒溫箱

      4.微量振蕩器

      5.一次性頭(10ul,200ul)

      6.去離子水

      【樣本要求】

      1本試劑檢測的樣本為豬血清,樣本應無菌采集,2~8貯存應不超過一周,長期應在-20以下保存。

      2避免使用嚴重溶血、有沉淀物、含懸浮纖維蛋白及污染長菌及含疊氮鈉血清樣本。

       

      【實驗準備】

      1試劑盒組分回溫平衡:試劑盒組分在實驗前,先取出置室溫30min,可以獲得jia結果。.

      2樣本稀釋:用試劑盒提供的樣本稀釋液將樣本作40倍稀釋,稀釋的樣本混合均勻能取得較好結果。

      3配制洗滌液將試劑盒所提供濃縮洗滌液直接用去離子水稀釋20倍(例:將50ml洗滌液加入950ml去離子水中)。若20倍濃縮洗滌液出現結晶,屬正?,F象,放置37℃至溶解后即可。

      【檢驗方法】

      1.加樣:根據樣本數量,取所需板條,檢測時,設陰、陽性對照各2孔,分別加入不用稀釋的陰、陽性對照血清100μl于相應孔中(可不設空白對照)。其余為樣本孔,每孔加100μl用樣本稀釋液稀釋好的樣本(可做單孔也可雙孔檢驗)。

      2.溫育:加樣后,蓋上蓋板膜,置37溫育30分鐘。

      3.洗板:甩去孔內液體,用洗滌液注滿反應板孔,靜置10s左右,直接甩出,洗滌3次,后一次洗滌后干板內液體。

      4.加酶:每孔加酶標記物100μl。

      5.溫育:加好酶標記物蓋板膜,置37溫育30分鐘。

      6.洗板:同步驟3。

      7.顯色:每孔加顯色劑100μl,振蕩混勻,37避光反應10分鐘。

      8.終止:每孔加終止液50μl,振蕩10秒,充分混勻,終止后即讀數。

      9.讀數:以450nm/ 630nm雙波長檢測,讀取各孔吸光度值(OD值)。

      【結果判定】

      在酶標儀上測各孔的OD值。檢測結果有效的條件是陽性對照孔的平均OD值≥0.6,陰性對照孔的平均OD值必須<0.15;樣品中抗體存在與否,或樣本中抗體的相對水平的高低由S/P值決定,S/P值計算時按以下方式處理:

        S/P=(樣本OD450/630值-NCx(—))/(PCx(—)-NCx(—)),其中NCx(—)表示陰性對照孔平均OD450/630值,PCx(—)表示陽性對照孔平均OD450/630值;

      當樣本的S/P≥0. 2時判為陽性;樣品S/P值<0.2時判為陰性;

      若進行大量樣本檢測時,可使用試劑盒專業分析軟件進行分析數據結果,該軟件可登陸本公司*網站下載。

      【注意事項】

      1.本試劑盒僅供研究使用。

      2.不要使用過期的試劑盒組分,不要把不用批次的組分混合使用。

      3.使用試劑盒之前,一定要仔細閱讀說明書。

      4.本試劑盒應按含有傳染性材料對待,試驗廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。

      5.微孔板從冷藏環境中取出時應在室溫中平衡至潮氣干盡后方可拆開,未用完的微孔板須放回有干燥劑的鋁箔袋并密封2℃-8℃保存。未用完的液體試劑應蓋好瓶蓋,與其它配套組份放入試劑盒中于2℃-8℃避光保存。

      6.應用微量移液器加入樣本及試劑,并經常校對其準確性。

      7.加洗滌液時應做到滿而不溢,防止孔口有游離酶不能洗凈或各孔間的交叉污染。

      8.終止液有腐蝕性,若濺到皮膚或衣物上應立即用大量清水沖洗干凈。

      【儲存條件及有效期】

      于2℃~8℃避光保存,防止冷凍,有效期12個月。

      【生產日期及批號】

      詳見包裝袋和外包裝盒。

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